懸浮細胞收集的處理方法

注意：瓶中運輸培養基不能繼續使用，請換用按照說明書培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。培養 懸浮細胞建議用未經TC處理的培養瓶。

STEP1:靜置4h后，請將瓶內所有細胞收集至6個15ml 的離心管110g(1000rpm)離心3min, 將所有離心 后的細胞沉淀收集到一個T25 培養瓶內，平放10分鐘，鏡下觀察細胞密度，拍照記錄后放入培養箱中繼 續培養，第二天密度達到80%即可傳代；

STEP2:懸浮細胞半換液處理：將培養瓶豎立在培養箱中靜置1小時左右，輕輕吸掉瓶內3ml 培養 基，然后補給3ml 的細胞完全培養基，傳代的時候可以直接補給5ml 細胞完全培養基，分兩個培養瓶培養，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細胞；

STEP3:懸浮細胞傳代方法:觀察細胞無碎片無死細胞的情況下，建議直接加入新鮮的細胞完全培養基直 接分瓶即可。

售后服務：

1.常溫細胞為 T25 培養瓶發貨，若收到細胞后狀態差，活率低，請當天拍照記錄，發給技術支持或 者銷售人員；根據情況，不能調整或者調整培養一周后，狀態沒好轉的，可給予重發細胞。

2. 收到細胞24小時內出現細菌、真菌、霉菌污染給于免費重發。4 8 小 時檢測支原體陽性無條件重發 (吸取上清至冰箱保存48小時之后檢測的不算準確結果)收到細胞有污染現象，請于收貨當天 及時拍照記錄，提供清晰的照片(照片為原培養瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細胞狀態的照片);在培養 瓶未開封的情況下，可給予重發細胞。

3.若收到細胞有漏液現象，請于收貨當天及時拍照記錄(照片為原培養瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細 胞狀態的照片);請保留原瓶培養基，并將原瓶培養基轉移到一個無菌的容器內培養，培養3天內出現 細胞污染現象，可給予重發細胞。

4. 收到常溫細胞時狀態無異常，用戶自身操作導致細胞污染、細胞狀態不佳、細胞凍存后復蘇不活 的，不予免費重發。

5. 細胞培養時，使用其他非細胞培養體系外源試劑處理導致細胞出現問題，不予免費重發。

6.非細胞出廠質量問題，客戶自身操作導致的細胞死亡，自收貨日起一個月內可以申請低價二次購 買折扣(原代細胞除外)。

7.細胞相關實驗受多種因素影響，非細胞鑒定問題，實驗數據不理想的，不予退/換細胞。

常溫細胞收貨注意事項：

觀察是否有異常現象

收到貨后如發現有任何異常現象，如污染，漏液，細胞漂浮等，請拍照記錄，并及時聯系我們銷售 人員或者技術支持。

將培養瓶放置培養箱中靜止

用75%酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，將 T25 瓶置于培養 箱中靜置2~4h 后進行操作，(注意：懸浮細胞請將培養瓶豎立在 培養箱中靜置),在此期間，請查看說明書以確定細胞屬性。

觀察細胞密度是否超過80%

觀察細胞密度，若超過80%則可正常傳代處理(有些原代細胞不 可傳代，請仔細查閱細胞說明書并根據實際情況決定),首次傳代推 薦比例1:2。

注意：傳代比例指的是同等大小容器的前提下，如需更換培養容器，則需換算培 養容器貼壁面積，例如：一個T25 瓶的貼壁面積相當于1個6cm 的皿，1個10cm的皿的貼壁面積相當于3個T25瓶，1個T75瓶的貼壁面積相當于3個T25 瓶。

觀察細胞密度，若細胞密度不到80%,建議吸出運輸培養基，加入5ml 細胞完全培養基，培養 到可傳代密度。