懸浮細胞復蘇、傳代、凍存及注意事項
一、接收注意事項：
1.懸浮細胞經過快遞運輸，會出現細胞皺縮和死細胞碎片等情況，收到時先放培養(yǎng)箱豎著靜置4小時以上，細胞全部沉淀在底部后輕輕轉移至超凈工作臺吸出瓶內上半部分培養(yǎng)基進行離心收集（避免丟失細胞）收集后如有細胞沉淀可以用新培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如離心管底沒有沉淀可直接丟棄。
下半部分細胞懸液平放顯微鏡下靜置后觀察密度和狀態(tài)，拍照反饋到群里，根據圖片可以給出接下來的處理建議（傳代或者換液）
二、懸浮細胞傳代： 如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
方法一：將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加新鮮培養(yǎng)液后重懸混勻按1：2的比例分到 新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力。
方法二：1) 半換液處理，豎著培養(yǎng)瓶靜置 10-20min 左右，肉眼可見大部分細胞沉在底部；
2) 輕輕吸掉 3ml 左右培養(yǎng)基，將剩余細胞懸起混勻；
3) 將細胞懸液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中，一般這樣傳代 3 次左右可以離心傳代一次
注意：使用試劑需要提前37度復溫，避免細胞遇冷受刺激皺縮。
三、后續(xù)處理建議：
懸浮細胞狀態(tài)在無碎片無黑點的情況下無需換液，觀察培養(yǎng)基偏黃及時進行補液2ml左右，當細胞出現分泌物可以使用半換液法處理，參考如下圖片：
